Bilirubin v prahu CAS 635-65-4se v glavnem pridobiva iz žolča. Bilirubin je netopen v vodi, topen v organskih topilih, kot so benzen, kloroform in ogljikov disulfid, ter rahlo topen v etanolu in etru. Bilirubin lahko raztopimo tudi v vroči mešanici etanola in kloroforma. Natrijeva sol bilirubina je zlahka topna v vodi, njegove kalcijeve, magnezijeve in barijeve soli pa so v vodi netopne. Bilirubin je monoklinični kristal svetlo oranžne ali globoko rdečkasto rjave barve. Njegova suha trdna snov je relativno stabilna, raztopina kloroforma pa je relativno stabilna tudi v temi. Je nestabilen v alkalni raztopini (kot je 0,1 mmol/L natrijevega hidroksida) ali ko naleti na ione trivalentnega železa in hitro oksidira v biliverdin. Bilirubin se lahko veže na glicin, alanin ali histidin. Dodajanje serumskih beljakovin, vitaminov ali EDTA lahko stabilizira bilirubin.
1. Priprava kalcijeve soli z metodo indirektne ekstrakcije kalcijeve soli: dodajte 3-3,5-krat supernatant nasičene apnene vode v svež prašičji žolč med mešanjem in nato nadaljujte z mešanjem 5-10min, Ph{ {4}}, odstranite peno, ko segrejete na 50 stopinj z gazo, še naprej segrevajte do vrenja, vztrajajte 2 minuti, ohladite, filtrirajte in pridobite kalcijevo sol. Priprava bilirubinskega končnega izdelka: vzemite kalcijevo sol in dodajte 0.8-kratno količino vode, da dobite pasto, jo presejte skozi 30-40 mrežo, dodajte 0,3% antioksidanta filtratu, dodajte sol in kislino da naravnate pH na 1,5, pustite stati 4 ure, filtrirajte, dodajte 8-10-kratno količino 80-odstotnega etanola filtrirnemu kolaču, zdrobite in dobro premešajte, dodajte antioksidant, pustite stati čez noč in dobite oborina. Dodajte 4-6-kratno količino 80 % ali več etanola in antioksidanta, premešajte in namočite čez noč. Ponovite ta postopek 3-4-krat in posušite oborino pod 70 stopinj, da dobite končni produkt bilirubina.
Obarjanje kalcijeve soli [HCl, težki natrijev sulfit] → obarjanje [etanol, težki natrijev sulfit] → obarjanje [70 stopinj ] → produkt bilirubina.
2. Priprava kalcijevega bilirubinata z metodo ekstrakcije s kloroformom: svežo prašičjo žolco naravnamo na pH 12 z natrijevim hidroksidom, segrejemo do vrenja, dodamo raztopino kalcijevega klorida, nato segrejemo do vrenja, ohladimo in filtriramo, da dobimo kalcijev bilirubinat. Prašičji žolč [NaOH, CaCl2] → [pH 12, 100 stopinj ] Priprava bilirubinskega praška CAS 635-65-4 kalcijeva sol bilirubin končni izdelek: bilirubinska kalcijeva sol se prilagodi pH 1-2 s klorovodikovo kislino 1:1, kislo vodo odlijemo, kloroform ekstrahiramo s kloroformom, speremo z brezvodnim etanolom in raztopino pustimo pri približno 5 stopinjah, da dobimo bilirubinski končni produkt.
Kalcijeva sol bilirubina [HCl] → [pH1-2] kislinska spojina [kloroform, brezvodni etanol] → [5 stopinj] bilirubin končni izdelek
3. Izboljšana metoda s kalcijevo soljo za kisanje s kalcijevo soljo: Vzemite svež prašičji žolč in dodajte 1 % kalcijevega hidroksida, dobro premešajte, hitro segrejte na 90-97 stopinj, hranite na toplem 10 minut in filtrirajte, da dobite kalcijeve soli. Segrevanje na 40 stopinj bo povzročilo videz maščobe, ki jo lahko nežno odstranite. Dobljeno kalcijevo sol lahko enkrat speremo z vročo vodo, da odstranimo odvečne alkalije in druge nečistoče. Vzemite kalcijevo sol in dodajte več kot 10-kratno količino vode, da jo enakomerno razpršite. Dodajte 1% antioksidanta in mešajte (60r/min), da po kapljicah dodate klorovodikovo kislino 1:2. V 40 minutah dosežete pH 2,0 in počakate, da pH ostane nespremenjen, da dobite kislo snov. Prašičji žolč [1 % kalcijev hidroksid] → [90-97 stopinj, 15 min] Žolčna kalcijeva sol [antioksidant, klorovodikova kislina] → [pH2,40 min] Pranje s kislim kislinskim alkoholom, pranje z vodo: Nakisani bilirubin se enakomerno porazdeli pri sobni temperaturi z 10-kratno količino etanola, pH ne sme biti višji od 5, dodamo 0,5% antioksidanta, premešamo in pustimo približno 1 uro za plastenje. Pojdite na zgornjo plast alkoholne raztopine in zberite oborjeni bilirubin. Sperite bilirubin s 50 stopinj toplo vodo približno 5 minut, zberite plavajoči bilirubin, hitro dodajte etanol za dehidracijo in odstranite etanol, da dobite surovi bilirubin. Kisla spojina [etanol] → [1h] obori bilirubin [50 stopinj vroča voda] → [etanol] ekstrakcija surovega bilirubina, izhlapevanje, kristalizacija in sušenje: Vzemite surovi bilirubin in dodajte 10-krat kloroform, da stresate pri 50 stopinjah 10 minut. Po potrebi ekstrahirajte 2-3-krat, ostanek pa mora biti bel. Ekstrakt kloroforma je bil podvržen vakuumski destilaciji, dokler ni bil skoraj suh, kar je povzročilo nastanek večine kristalov bilirubina. Po ohlajanju na sobno temperaturo dodamo etanol in nadalje ohladimo na 4 stopinje 10 minut. Kristale bilirubina smo filtrirali in obdelali z brezvodnim etanolom ali etrom, čemur je sledilo vakuumsko sušenje, da smo dobili bilirubin visoke kakovosti.
Surovi bilirubin [kloroform] → [10 min] raztopina kloroforma [kristalizacija] → bilirubin visoke kakovosti
4. Priprava raztopine za hidrolizo z metodo ekstrakcije z ionsko izmenjevalno smolo: Vzemite svež kravji žolč, ga filtrirajte z gazo, dodajte 2 mol/L raztopine natrijevega hidroksida, da med mešanjem uravnate pH na 10, zavrite in filtrirajte, da dobite hidrolizat.
Adsorpcija in elucija žolčne kisline s kolono s smolo za hidrolizno raztopino: prekuhano raztopino za hidrolizo vlijemo v predhodno segreto kolono s smolo, dokler barva iztoka ne postane temnejša in je adsorpcija nasičena.
Dodajte hladno vodo, dokler temperatura znotraj kolone ne pade na sobno temperaturo, nato pa dodajte razredčeno raztopino natrijevega bisulfit hidroklorida z vrha kolone, da bo pH iztoka 1.
Sperite s 75 % etanolom, zberite, ko je eluent temno zelena motna raztopina, in spirajte, dokler se iztok ne zbistri in je pH skoraj nevtralen. Ponovno sperite s 95% etanolom.
Zberite elucijsko raztopino etanola za pripravo žolčne kisline. Hidrolizna raztopina [ionsko izmenjevalna kolona] → [75 % etanol, 95 % etanol] Etanol eluent za elucijo, koncentracijo in sušenje bilirubina: Sprostite ves 95 % etanol iz kolone, namočite v kloroform za 10 minut in zbirajte kloroformski eluent, dokler ne pojavi se rumena barva.
Destilirajte eluent kloroforma skoraj do suhega, dodajte brezvodni etanol in nadaljujte z zbiranjem, dokler kloroforma ne zmanjka. Ko je vroče, filtrirajte, zberite bilirubin, posušite in dobite končni bilirubinski produkt.
Yolanda
Mobilni: +86 -29-86107037-8012
E-pošta:sales9@konochemical.com
Tel/Wechat: 18729555803